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ATP相关检测技术概述

三磷酸腺苷(Adenosine Tri-Phosphate, ATP)是自然界各种生命活动中共用的能量载体。无论是真核细胞还是原核细胞,都以ATP作为能量储存和转移的分子。ATP可作为细胞活性的一个标志物。具有代谢活性的细胞含有一定量的ATP,检测ATP含量可作为培养细胞增殖和细胞毒性的定量指标;而在细胞发生凋亡或坏死时,其ATP含量会迅速下降。通过监测ATP含量的改变,可以评价多种药物、生物制剂或生物活性物质引起的细胞杀伤、细胞抑制和细胞增殖作用。ATP也常作为微生物污染的一个指标,微生物繁殖引起食品、药品等ATP含量的增高,可以被敏感地检测到。

ATP检测可以用成色反应、荧光、化学发光或同位素等方法实现。采用化学发光方法检测ATP,具有更高的敏感性,并具有简便、快速等特点,因此是目前更为流行的方法。化学发光方法检测ATP,是基于萤火虫荧光素酶催化荧光素氧化,消耗ATP,发出光子的高效发光反应;该反应的发光效率极高,发光量与ATP含量有很好的线性关系。本公司生产的ATP检测试剂盒,应用突变重组的萤火虫荧光素酶,催化长时发光反应,专门测定ATP含量。

生物体内多种酶促反应以ATP为底物,消耗能量;ATP的高能磷酸键断裂,形成ADP或AMP。多种具有重要生物功能的酶如激酶、ATP酶等产生ADP,通过检测其酶促反应中ADP与ATP比值,可以间接监测酶促反应的进程。细胞在发生凋亡或坏死时,其ADP与ATP含量的变化特征不同,检测细胞中ADP与ATP比值,也是区分细胞凋亡或坏死的一个间接指标。本公司生产的ATP/ADP检测试剂盒,在测定ATP含量的基础上,进一步将ADP转化为ATP,采用相同的ATP测定方法,对ADP含量进行定量,从而得到ADP与ATP比值。单个样品一体化的测定方法,给实验工作带来很大的便利。