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DNA片断纯化技术概述

DNA片断回收纯化,也是分子生物学实验室常用的技术。DNA酶切片断,或PCR产物,含有缓冲液成分、酶、其它DNA片断或引物成分,有可能影响后续的连接、克隆或其它操作。 对于非单一条带的DNA片断,通常需要经琼脂糖电泳分离,回收所需片断。早期分子生物学研究中,曾使用多种方法回收琼脂糖电泳分离出的片断。这些方法有的需要特定的仪器, 或手续繁杂,结果也不理想。目前实验室已普遍接受的商品化的DNA片断回收纯化试剂盒,是通过硅胶基质材料吸附DNA,清除其他杂质。各种试剂盒采用的基质材料有所差异, 试剂盒的溶胶结合液配方不同,获得DNA片断的回收率各不相同。依操作方法不同,基质吸附试剂盒可分为玻璃奶型和柱离心型,实验人员可能对之各有偏好。

对于单一条带的DNA酶切片断或PCR产物,最简单的纯化方法是直接乙醇沉淀。但乙醇沉淀不能完全清除引物成分和其它DNA接头小片断。如果这些成分影响下一步工作, 则需要通过硅胶基质吸附的方法进行纯化。由于不需要凝胶电泳分离,硅胶基质直接吸附避免了琼脂糖成分的干扰,这种单一条带DNA的回收纯化效率会明显提高。

本公司提供两种DNA凝胶回收试剂盒,为对玻璃奶型和柱离心型方法有不同偏好的实验人员提供选择。并提供一种价廉实用的单一条带DNA纯化试剂盒。

对于凝胶回收操作,无论采用哪个公司的产品,尽量增高切下胶块中DNA与凝胶含量的比例(仔细分离去除无关胶块),是提高回收效率的关键所在。