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报告基因检测技术概述

报告基因检测分析方法,是功能基因组学研究的一个重要手段,同时在反式作用蛋白的机制研究,和相关药物或蛋白筛选工作中,有广泛的应用。报告基因分析系统,是把顺式调控元件(DNA非编码序列)与一种编码新的产物的DNA序列--被称为报告基因的序列连接起来,在细胞内该基因的转录翻译过程中,测定报告基因的表达产物量或活性,来判断顺式调控元件的调控作用。这种间接的测定技术,提供了一种简单、有效、有时是唯一可行的检测体系。

理想的报告基因通常应具备以下特点:基因产物必须能与转染前真核细胞内任何相似的产物相区别;细胞内其它的基因产物不会干扰报告基因产物的检测;基因产物在细胞内的含量能够实时反映该基因的转录活性状态;报告基因编码产物的检测方法应该快速、简便、灵敏度高而且重现性好。荧光素酶(luc) 、β-半乳糖苷酶(β-gal) 、氯霉素乙酰转移酶(CAT) 、β-葡萄糖苷酸酶(GUS) 、分泌型碱性磷酸酶(SEAP) 、绿荧光蛋白( GFP) 、生长激素(hGH)等是实验室较为常见的报告基因。

报告基因检测技术,涉及报告基因载体质粒构建、细胞转染、报告基因产物测定等方法。在检测体系中一般包含另一种报告基因质粒,共转染同一细胞,以作为转染效率和细胞数量、状态的内参照。

本公司生产的系列报告基因检测试剂盒,分别应用于荧光素酶(luc) 、β-半乳糖苷酶(β-gal) 、氯霉素乙酰转移酶(CAT)的报告基因活性检测。其中的双荧光素酶检测试剂盒,是国内首次自行生产的产品,在许多实验室长期使用,获得了满意的效果。氯霉素乙酰转移酶活性检测,通常需要用同位素方法,导致该方法很难在实验室广泛使用。我公司生产的氯霉素乙酰转移酶活性检测试剂盒,则首次采用荧光检测方法,为研究人员提供一种简便的选择。